Садржај
Хемичари често користе инструмент познат као ултраљубичасто видљив или УВ-Вис, спектрометар за мерење количине ултраљубичастог и видљивог зрачења које апсорбују једињења. Количина ултраљубичастог или видљивог зрачења које апсорбује неко једињење зависи од три фактора: концентрације, ц, у узорку; дужина пута, л, држача узорка, која одређује удаљеност у којој узорак и зрачење међусобно делују; и коефицијент моларне апсорпције, е, који се понекад назива и коефицијент моларне изумирања. Једнаџба је наведена као А = ецл и позната је као Пиров закон. Једначина тако садржи четири променљиве, а да би се утврдила било која од четири потребне су познате вредности за три.
Калкулације
Одредите апсорбанцију за једињење на жељеној таласној дужини. Ове информације могу се извући из спектра апсорпције произведеног било којим стандардним УВ-Вис инструментом. Спектри су обично приказани као апсорбанција у односу на таласну дужину у нанометарима. Генерално, појава било каквих „врхова“ у спектру указује на таласне дужине које су од интереса.
Израчунајте концентрацију узорка у молима по литри, мол / Л, такође познато као моларност, М. Општа једначина за моларност је
М = (грами узорка) / (молекулска маса једињења) / л раствора.
На пример, узорак који садржи 0,10 грама тетрафенилциклопентадиенона, молекулске масе 384 грама по молу, раствореног и разблаженог у метанолу до крајње запремине од 1,00 литра, показао би моларност од:
М = (0,10 г) / (384 г / мол) / (1,00 Л) = 0,00026 мол / Л.
Одредите дужину пута кроз држач узорка. У већини случајева то је 1,0 цм. Могуће су и друге дужине пута, посебно када се ради о држачима за узорке намењеним гасовитим узорцима. Многи спектроскопи укључују дужину пута са информацијама о узорку издвојеним на спектар апсорбанције.
Израчунајте коефицијент моларне апсорпције према једначини А = ецл, где је А апсорбанција, ц је концентрација у моловима на литру, а л је дужина пута у центиметрима. Решена за е, ова једначина постаје е = А / (цл). Настављајући пример из корака 2, тетрафенилциклопентадиенон показује два максимума у свом спектру апсорбанције: 343 нм и 512 нм. Ако је дужина стазе 1,0 цм, а апсорбанција на 343 била 0,89, тада
е (343) = А / (цл) = 0,89 / (0,00026 * 1,0) = 3423
А за апсорбанцију 0,35 на 512 нм,
е (512) = 0,35 / (0,00026 * 1,0) = 1346.