Према америчкој Агенцији за заштиту животне средине, ЛЦ50 је дефинисан као концентрација хемикалије у ваздуху или води која би требало да изазове смрт код 50 одсто тестних животиња које живе у том ваздуху или води. Са тестовима који се обично раде на мишевима или пацовима, на нивоу ЛЦ50 50% испитиваних животиња ће умрети након једног излагања. Тестови урађени за утврђивање вредности ЛЦ50 одређују која се животиња користи у тесту. Иако се тестови токсичности на мишевима и пацовима не шире увек на људе, вредност ЛЦ50 је важна и користи се као сигурна страна када људи раде око материјала.
Запишите своје стандарде испитивања како бисте укључили које ће животиње бити тестиране, колико животиња је у свакој испитној групи, које ће концентрације хемикалије бити тестиране и дужина излагања.
Испитујте једну групу испитиваних животиња једној концентрацији хемикалије у контролисаном лабораторијском окружењу. Наставите док све групе, осим контролне групе, не буду подвргнуте свакој од различитих концентрација хемикалије.
Дефинишите ЛЦ50 вредност као најнижу концентрацију хемикалије, у деловима на милион (ппм), где умре најмање 50 процената тестираних животиња.