Како израчунати ХПЛЦ резолуције

Posted on
Аутор: Monica Porter
Датум Стварања: 20 Март 2021
Ажурирати Датум: 3 Јули 2024
Anonim
KAKO PRAVIM THUMBNAIL ZA KLIP?
Видео: KAKO PRAVIM THUMBNAIL ZA KLIP?

Хемичари користе течну хроматографију високих перформанси или ХПЛЦ за одвајање смеша једињења. Уопштено, метода се састоји од убризгавања узорка у колону где се меша са једним или више растварача. Различита једињења се адсорбирају или „држе“ у колони у различитим степенима; и док растварач гура једињења кроз колону, једна од компоненти смеше ће прво изаћи из колоне. Инструмент детектује једињења док излазе из колоне и производи хроматограм који се састоји од графа са временом задржавања на к оси и интензитетом сигнала од детектора на оси и. Како једињења излазе из колоне, они стварају „врхове“ у хроматограму. Опћенито, што су удаљенији и ужи врхови хроматограма, већа је резолуција. Научници сматрају да резолуција од 1,0 или више представља адекватно раздвајање.

    Измерите ширину два суседна врха у хроматограму бележећи где су вредности оси к у дну сваког врха. Ос к представља време задржавања, обично се мери у секундама. Дакле, ако врх почиње у 15,1 секунди и заврши у 18,5 секунди, његова ширина је (18,5 - 15,1) = 3,4 секунде.

    Одредите времена задржавања тако што ћете забележити време, тј. Локацију на оси к, што одговара локацијама максима врхова. Ова вредност ће бити обично на пола пута између две вредности коришћене за израчунавање ширине у кораку 1. Пример, дат у кораку 1, на пример, показао би максимум око 16,8 секунди.

    Израчунајте резолуцију Р између два врха према

    Р = (РТ1 - РТ2) /,

    где РТ1 и РТ2 представљају време задржавања врхова 1 и 2, а В1 и В2 представљају ширину врхова узетих у њиховим базама. Настављајући пример из корака 2 и 3, један врх показује време задржавања од 16,8 секунди и ширину од 3,4 секунде. Ако би други врх показао време задржавања од 21,4 секунде са ширином од 3,6 секунди, резолуција би била

    Р = (21,4 - 16,8) / = 4,6 / 3,5 = 1,3.