Како израчунати концентрацију помоћу апсорбанције

Posted on
Аутор: John Stephens
Датум Стварања: 25 Јануар 2021
Ажурирати Датум: 21 Новембар 2024
Anonim
ELISA Plate Absorbance and Data Analysis using SoftMax Pro Software
Видео: ELISA Plate Absorbance and Data Analysis using SoftMax Pro Software

Садржај

Многа једињења апсорбују светлост у видљивом или ултраљубичастом делу електромагнетног спектра. Користећи Беерс закон, можете израчунати концентрацију раствора на основу тога колико светлости апсорбује.

Коришћење закона о пивима

Беров закон регулише количину апсорбоване радијације и указује да је апсорбанција директно пропорционална концентрацији. Стога, како концентрација једињења раствореног у датом растварачу расте, апсорбанција раствора такође треба да се пропорционално повећа. Хемичари користе овај однос како би одредили концентрацију непознатих раствора. Ово прво захтева податке о апсорбанцији на низу раствора познате концентрације који се називају стандардни раствори. Подаци апсорпције и концентрације се затим цртају у калибрацијској кривуљи да се успостави њихов математички однос. Концентрација непознатог узорка може се одредити мерењем његове апсорбанције.

Израчунавање концентрације раствора

Корак 1. Конструирајте калибрацијску скицу апсорбанције на оси и и концентрације на оси к за стандардна решења. Тачке података треба да падају по разумно правој линији. Две тачке података представљају апсолутни минимум, а више је боље.

Корак 2. Нацртајте „најприкладнију“ равну линију кроз тачке података и продужите линију да пресече оси и. Изаберите две случајне тачке, а не тачке података, на линији и одредите њихове к и и координате. Означите ове координате као (к1, и1) и (к2, и2).

3. корак Израчунајте нагиб, м, линије према формули м = (и1 - и2) / (к1 - к2). Одредите и-пресретање, скраћено б, бележећи и-вредност тамо где линија прелази и-ос. На пример, за две случајне тачке на линији на координатама (0,050, 0,105) и (0,525, 0,315), нагиб је дат помоћу:

м = (0,105 - 0,315) / (0,050 - 0,525) = 0,440.

Ако линија прелази оси и на 0,08, тада ова вредност представља и-пресретање.

4. корак Напишите формулу линије калибрационог графикона у облику и = мк + б. Настављајући пример из корака 3, једначина би била и = 0,440к + 0,080. Ово представља једначину калибрационе кривуље.

Корак 5 Замените апсорбанцију раствора непознате концентрације у једначину која је одређена као и и решите за к, где к представља концентрација. Ако би, на пример, непознато решење показало апсорпцију 0,330, једначина би дала:

к = (и - 0.080) / 0.440 = (0.330 - 0.080) / 0.440 = 0.568 молова по литри.

Тхеори Вс. Вежбајте

Иако Беров закон каже да су апсорпција и концентрација директно пропорционални, експериментално је то тачно само у уским распонима концентрација и у разблаженим растворима. Тако ће стандардна раствора која се крећу у концентрацији од, на пример, 0,010 до 0,100 молова по литри испољити линеарност. Распон концентрације од 0,010 до 1,00 мола по литри, вероватно неће.