Садржај
- Лагана микроскопија и ћелијска биологија
- Десеци експерименталних поступака су развијени
- Хемијске мрље и лагана микроскопија
- Једноставно зумирање
- Предности флуоресцентне микроскопије
- Недостатак светлосних микроскопа
Светлосни или сложени микроскоп је алат са којим ће се вероватно сусрести сваки студент биологије. Разумевање предности светлосног микроскопа пружиће увид у савладавање његове корисности за учионицу или клинику. Многе експерименталне технике које су усавршене за употребу светлосним микроскопом, једноставност употребе и његова релативно повољна цена у поређењу са другим типовима микроскопа чине га најповољнијим избором за многе примене науке о животу.
Лагана микроскопија и ћелијска биологија
Будући да се ћелије не могу посматрати без надзора, микроскопија је кључна компонента за проучавање ћелијске структуре и функције. Светлосни микроскоп користи извор светлости за осветљавање узорка на светлом пољу. Узорак је обојен како би структуре које су нормално прозирне или готово безбојне тамније од позадине и лакше видљиве. Друга техника микроскопије је флуоресцентна микроскопија. Уместо да на тамној позадини користите тамну мрљу, ћелије се обоје флуоресцентним бојама и посматрају на тамној позадини.
Десеци експерименталних поступака су развијени
Проучавање ткива лаганом микроскопијом се практикује више од 50 година. Лагана микроскопија је најдоступнији облик микроскопије широм света и још увек је једно од главних алата за тренирање патолога или лекара који дијагностицирају болести испитивањем микроскопске структуре ткива. Хиљаде лабораторија широм света усавршило је на десетине експерименталних поступака, а многе од њих су слободно доступне. Комбинација ниске цене и велике количине биолошких информација које светлосни микроскоп пружа чини непроцењивим алатом за истраживање и медицину.
Хемијске мрље и лагана микроскопија
За посматрање узорка под светлосном микроскопијом потребна је помоћ шарених хемијских мрља. Ове плаве, црвене, зелене и браон мрље су фиксиране на ткиво јасном хемијском супстанцом која се зове пермоунт, која отврдњава када је изложена ваздуху. На тај начин, у комбинацији, ове хемијске мрље и ткива трају дуги низ година без избледења, омогућавајући научницима да дуго прегледавају исти узорак без губитка боје. Губитак видљивости је ограничење флуоресцентне микроскопије јер флуоресцентне боје временом бледе.
Једноставно зумирање
Способност сложеног микроскопа да лако зумира између посматрања репа мале рибе 50 пута веће од стварне величине до гледања артерија у репу 400 пута веће од стварне величине нема премца других врста микроскопа. Патолози прегледавају биопсију, или ситне комаде ткива уклоњеним иглом, под сложеним микроскопом и често зумирају и умањују како би дали своју најбољу процену. Састављени светлосни микроскоп остаје најбоља опција за ову врсту истраживања.
Предности флуоресцентне микроскопије
Флуоресцентна микроскопија омогућава веће визуелне детаље гледаоцу јер флуоресцентне боје могу да циљају специфичне структуре унутар ћелије. Флуоресцентни молекули у ћелијском узорку звани флуорофори апсорбују светлост у једној таласној дужини и емитују светлост различите таласне дужине. Флуоресцентна бојила могу се користити са специфичним протеинима и антителима да би се истакле структуре, па чак и појединачни молекули унутар ћелије. Технике флуоресцентне микроскопије омогућавају да се у узорку користи више боја.
Недостатак светлосних микроскопа
Технологија микроскопије експлодирала је последњих деценија, а неки од напреднијих микроскопа дају детаљније информације од класичног једињења (светлосног) микроскопа. Флуоресцентни микроскопи омогућавају научницима да виде два различита протеина на истој локацији у ћелији користећи црвене и зелене маркере који се преклапају да би добили жуту боју. Електронски микроскопи показују тродимензионалне карактеристике ћелијске површине. Да назовемо један недостатак светлосног микроскопа, он не поседује неке напредне могућности флуоресцентне или електронске микроскопије јер користи само белу светлост. Међутим, електронски микроскопи и флуоресцентни микроскопи крећу се у ценама од десетина хиљада до стотина хиљада долара, док се сложени микроскоп тренутно може купити за само 100 УСД.