Како измерити оптималну температуру за ензим

Posted on
Аутор: Robert Simon
Датум Стварања: 20 Јуни 2021
Ажурирати Датум: 14 Може 2024
Anonim
Активность фермента (Enzyme activity). Влияние температуры, рН, концентрации субстрата
Видео: Активность фермента (Enzyme activity). Влияние температуры, рН, концентрации субстрата

Ензим је протеин који катализује (повећава брзину) хемијских реакција. Оптимална температура већине ензима или температура на којој ензими најбоље олакшавају реакције је између 35 и 40 степени Целзијуса. Повећавање температуре унутар овог прозора повећава брзину реакције, јер побуди молекуле и повећава брзину којом се ензими / реактанти сударају и реагују на производњу производа. Међутим, превисока температура може денатурирати ензим и спречити га да уопште делује.

Одредите оптималну температуру ензима загревањем реакције у инфинитесмалним количинама и узимањем малих узорака реакције да бисте утврдили када се појави максимална брзина стварања производа.

    Изаберите метод. Одредите како ћете мерити концентрацију производа у различитим тачкама експеримента. На пример, можете мерити концентрацију многих производа коришћењем спектрофотометра и израчунавањем концентрације апсорбанције или мерењем флуоресценције и израчунавањем концентрације из флуоресценције.

    Подесите експеримент Поставите своје реактанте и ензим у малу посуду с поклопцем, као што је сцинтилациона бочица. Реакција ће започети. Посуду за сцинтилацију ставите у већу чашу воде собне температуре. Поставите чашу на грејну плочу. У чашу ставите термометар. То вам омогућава да мерите температуру реакције у различитим тачкама.

    Узмите 100 микролитра узорак реакције на собној температури, око 25 степени Целзијуса. Укључите грејну плочу. На различитим температурама између 30 и 40 степени Целзијуса (30,5, 31, 31,5, итд.) Узмите 100 микролитера узорака своје реакције.

    Одредите концентрацију производа на свакој температури. Када температура порасте изнад 40 степени Целзијуса, приметићете смањење брзине којом се супстрат претвара у производ, јер се ензим денатурише. Тачка у којој се производ производи највећом брзином је тачка у којој је температура оптимална.