Није давно било да је генетски инжењеринг ствар научне фантастике - чинећи један организам да расте с карактеристикама другог. Од 1970-их, међутим, технике генетске манипулације напредовале су до тачке у којој је спајање стране ДНК у организам готово рутина. На пример, гени за отпорност на штеточине могу да се споје у кукуруз, гени за стварање људског инсулина могу се ставити у бактерије, а гени за опонашање људског карцинома могу се ставити у лабораторијске мишеве. Појединости поступка сувише су сложне да би се могле описати у кратком чланку, са много опција у сваком кораку, али концептуални опис логичког низа корака је прилично једноставан.
Инкубирајте ДНК плазмида и ДНК који вас занимају рестрикцијским ензимом. Рестриктивни ензим открит ће специфичну секвенцу ДНК база и у том тренутку пресјећи ДНК. Рестриктивни ензими изведени су из неких механизама одбране бактерија против вируса. Они су молекули који ће пресрести ДНК где открију задати образац база.
Инкубирајте изрезани плазмид и фрагменте геномске ДНК ДН лигазом. Са већином рестрикцијских ензима, кружни плазмид и фрагменти геномске ДНК имаће комплементарне "лепљиве крајеве" који ће се хватати једни за друге. ДНА лигаза ће затим завршити лепљење комада заједно. Резултат је гомила кружних плазмида који укључују делове геномске ДНК.
Уметните плазмиде у бактерије и узгајајте бактерије да расту колоније организама импрегнираних модификованом ДНК. Ако ваш плазмид има ген резистентан на антибиотике који недостаје бактеријама домаћинима, можете аутоматски прегледати успешно модификоване бактерије култивацијом бактерија на медијуму за раст који је препуњен антибиотицима. Постоји неколико метода за убацивање плазмида у бактерију, попут употребе микро-игле, примењивање електричног поља за отварање малих рупа у мембрани бактерија или једноставно стављање бактерија и плазмида у исти раствор и омогућавање бактеријама да их апсорбирају природно.
Узорке ћелија из различитих колонија модификованих бактерија. Оперите узорковане ћелије раствором детерџента да бисте разградили бактеријске мембране и екстраховали ДНК, а затим је загрејали или изложили натријум хидроксиду да бисте одвојили нити. Ово излаже базну секвенцу ДНК анализи.
Инкубирајте ДНК флуоресцентном сондом. Осветлите ултраљубичасто светло на инкубираној ДНК и посматрајте флуоресценцију. Сонда се састоји од кратког низа ДНК-а који се поклапа са уметнутом геномском ДНК. Тамо где се сонда подудара са ДНК који тражите, он ће сијати када буде осветљен.
Изолирајте бактерије из колонија које садрже ген који желите да уметнете. Умножите ДНК пуштањем колонија бактерија да расте, или извадите ДНК као и раније и дуплицирајте га у машини за ланчане реакције полимеразе.