Садржај
Ензими су протеини који делују на спуштање енергије активације у хемијским реакцијама а да их притом не потрошимо. Биолошки су ензими основни молекули који убрзавају реакције у метаболичким системима. Као резултат, ензимска кинетика проучава брзину реакције ензима у различитим хемијским срединама. Многи фактори утичу на брзину ензима. Концентрација супстрата, температура, инхибитори и пХ утичу на праг ензима у хемијској реакцији. Помоћу линеарних односа, попут парцеле Линевеавер-Бурк, можете пронаћи максималну брзину ензима.
Једноставност израчуна Вмака на линији Линевеавер-Бурк
Започните цртањем Мицхаелис-Ментен-ове једнаџбе да бисте добили криву хиперболе. Затим користите реципрочну Мицхаелис-Ментен-ову једнаџбу да бисте добили облик пресретања нагиба активности ензима. Затим ћете добити стопу активности ензима као 1 / Во = Км / Вмак (1 /) + 1 / Вмак, где је Во почетна брзина, Км је константа дисоцијације између супстрата и ензима, Вмак је максимална брзина, а С је концентрација супстрата.
Пошто се једнаџба пресретања нагиба односи на стопу концентрације супстрата, можете користити типичну формулу и = мк + б, где је и зависна променљива, м је нагиб, к је независна променљива, а б је и-пресретање Пре одређеног рачунарског софтвера користили бисте графички папир да бисте повукли црту. Сада користите типични софтвер за базе података да нацртате једнаџбу. Дакле, знајући почетну брзину, Во и различите концентрације супстрата, можете да створите равну линију. Црта линије представља нагиб Км / Вмак и и-пресретање 1 / Вмак. Затим користите реципрочну и-пресретање да бисте израчунали Вмак активности ензима.
Користи се за парцелу Линевеавер-Бурк
Инхибитори мењају максималну брзину активности ензима углавном на два начина: конкурентно и неконкурентно. Компетитивни инхибитор се везује на место активације ензима који блокира супстрат. На овај начин, инхибитор се такмичи са супстратом да се веже на месту ензима. Допуштање високе концентрације конкурентног инхибитора осигурава везање на место. Стога, конкурентски инхибитор мења динамику ензимске брзине.Прво, инхибитор модификује нагиб и к-пресретање Км стварајући много стрмији нагиб. Међутим, максимална стопа, Вмак, остаје иста.
С друге стране, неконкурентни инхибитор се веже на другом месту од места активације ензима и не такмичи се са супстратом. Инхибитор модификује структурне компоненте места активације спречавајући супстрат или други молекул да се веже на место. Ова промена утиче на афинитет супстрата према ензиму. Неконкурентни инхибитори мењају нагиб и и-пресретање линије Линевеавер-Бурк, смањујући Вмак уз повећање и-пресретања са стрмијим нагибом. Међутим, пресретање к остаје исто. Иако је заплет Линевеавер-Бурк на више начина користан, линија цртежа има ограничења. Нажалост, парцела почиње да искривљава стопе при врло високим или ниским концентрацијама супстрата, стварајући екстраполације на парцели.