Садржај
Ланчана реакција полимеразе (ПЦР) и њен научни сродник, клонирање експримираних гена, два су биотехнолошка открића 1970-их и 1980-их који и даље играју значајну улогу у покушају разумевања болести. Обе ове молекуларне технологије дају научницима средства да направе више ДНК на различите начине.
Историја
Молекуларни биолог Кари Муллис револуционирао је генетску науку када је у прољеће 1983. године замислио ланчану реакцију полимеразе (ПЦР), чиме је добио Нобелову награду за хемију 1993. Овај пробој нашао се на врху истраживања клонирања које потиче из 1902. године. Није дошло до великог напретка у клонирању све до новембра 1951. године, када је тим научника из Филаделфије клонирао ембрион жабе. Велики пробој догодио се 5. јула 1996., када су научници клонирали јање „Долли“ из смрзнуте ћелије млека.
ПЦР и клонирање
Клонирање је једноставно стварање једног живог организма од другог, стварајући два организма са истим тачним генима. ПЦР омогућава научницима да током неколико сати произведу милијарде примерака дела ДНК. Иако ПЦР утиче на технологију клонирања стварајући велике количине ДНК које се могу клонирати, ПЦР се суочава са потешкоћама контаминације, где се узорак са нежељеним генетским материјалом такође може реплицирати и произвести погрешну ДНК.
Како ради ПЦР
ПЦР процес укључује разградњу ДНК загревањем, што одмотава двоструку спиралу ДНК у одвојене појединачне нити. Једном када се ови ланци одвоје, ензим зван ДНК полимераза чита секвенцу нуклеинских киселина и ствара дупликат ланца ДНК. Овај се поступак понавља изнова и изнова, удвостручујући количину ДНК у сваком циклусу и повећавајући ДНК експоненцијално све док се не створе милиони копија оригиналне ДНК.
Како делује клонирање
Клонирање ДНК укључује прво изоловање изворне и векторске ДНК, а затим коришћењем ензима за резање ове две ДНК.Затим научници везују изворну ДНК за вектор са ензимом ДНК лигазе који поправља спајање и ствара један ланац ДНК. Тај ДНК се затим уводи у ћелију организма домаћина, где расте са организмом.
Апликације
ПЦР је постао стандардни алат у форензичкој науци јер може да умножи веома мале узорке ДНК за лабораторијско тестирање више кривичних дела. ПЦР је такође постао користан археолозима да проучавају еволуцијску биологију различитих животињских врста, укључујући узорке старе више хиљада година. Технологија клонирања омогућила је релативно лако изолирање фрагмената ДНК који садрже гене за проучавање функције гена. Научници верују да се поуздано клонирање може користити за узгој пољопривреде продуктивнијим умножавањем најбољих животиња и усева, као и за точнијим медицинским испитивањима пружањем тест животиња које све реагују на исти начин на исти лек.