Садржај
- Општа екстракција ДНК
- Биљне и животињске ћелије
- Екстракција биљне ДНК
- Екстракција ДНК животиња
- ДНК разлике
Структура дволанчане ДНК је универзална у свим живим ћелијама, али постоје разлике у методама екстракције геномске ДНК из животињских и биљних ћелија. Иако геномска ДНК живи у језгру ћелија, количина и чистоћа извучене ДНК зависе од врсте и величине ћелије. На пример, одређене ћелије садрже више ДНК и нечистоће од других. Читајте даље како бисте сазнали више о разликама у екстракцији ДНК.
Општа екстракција ДНК
Ако третирате биљне и животињске ћелије сапуном, то ће разградити липиде у ћелијским и нуклеарним мембранама. Затим ће се ДНК смеша одвојити од ћелијских мембрана и протеина. Затим можете користити алкохол да исталожите ДНК у раствору. У зависности од количине у узорку, ДНК може бити видљива голим оком. Међутим, имајте на уму да овај једноставан поступак не производи нужно ДНК високе чистоће.
Биљне и животињске ћелије
Биљне ћелије се разликују од животињских ћелија по тврдој станичној стијенци и органелама попут хлоропласта. Такође садрже протеине и ензиме који играју улогу у фотосинтези. Неке биљне ћелије имају полиплоидију, што значи да имају више од једне копије сваког хромозома по ћелији. Поред тога, ћелијски процеси који се одвијају у биљкама као што је фотосинтеза стварају низ секундарних метаболита. Животињске ћелије немају ћелијску стијенку, али им и даље требају хемикалије попут натријум-додецил сулфата (СДС) да би пореметиле ћелијску мембрану да би се ослободила геномска ДНК.
Екстракција биљне ДНК
Биљни генски ДНК је теже издвојити због ћелијског зида биљке. Можете је уклонити хомогенизацијом или додавањем целулазе да разградите целулозу која чини ћелијски зид. Поред тога, метаболити присутни у биљној ћелији могу ометати екстракцију геномске ДНК контаминирањем ДНК узорка током процеса таложења.
Екстракција ДНК животиња
Периферни леукоцити у крви су главни извор животињске геномске ДНК, али прикупљање узорака је тешко јер крв мора доћи директно из животиње. Крв садржи низ једињења попут протеина, липида, белих крвних зрнаца, црвених крвних зрнаца, тромбоцита и плазме који могу контаминирати ДНК узорак. Међутим, примарни контаминант животињске ДНК извађен из узорака крви је хеме, који је непротеинска компонента хемоглобина.
ДНК разлике
Разлике између биљне и животињске ДНК леже у редоследу база у спирали. Једињења која се налазе у биљним ћелијама немају у животињским ћелијама, а ДНК базне секвенце то одражавају. Такође, геномска биљна ДНК често је већа од животињске ДНК. Ове разлике такође утичу на методе екстракције, принос и чистоћу ДНК.