Како израчунати концентрацију ћелија

Posted on
Аутор: John Stephens
Датум Стварања: 25 Јануар 2021
Ажурирати Датум: 9 Може 2024
Anonim
Formatiranje složenih tabela
Видео: Formatiranje složenih tabela

Научници и техничари често морају да израчунају концентрацију ћелија у суспензији. На пример, када пацијенту крв узме у ординацији, лабораторија може да користи одређене методе да би пронашла количину белих крвних зрнаца у датој количини крви. То доктору даје много информација о здрављу њеног пацијента, посебно о његовом имунолошком систему и о томе да ли се бори са инфекцијом или неком другом болешћу. Тестови попут ове могу да претражују многе друге ћелије у крви, као и кичмену и другу телесну течност, као што је број сперматозоида у сперми за потребе плодности. Научници такође израчунавају ћелијске концентрације бактерија, квасца и других микроорганизама за бројне сврхе, у распону од еколошких истраживања до индустријских технологија. Једна од најчешћих техника се такође подучава у многим часовима биологије на факултету и користи уређај који се зове пребројавајућа комора.

    Пре него што ћелија суспензија уђе у комору за бројање, можда ће јој требати разблаживање јер може садржати хиљаде или милионе ћелија. У том случају ћелије се не могу разумно пребројати. За разблаживање узорка, стерилном пипетом ставите десет микролитара ћелијског раствора у епрувету која садржи 90 микролитара разблаживача. Тип разблаживача зависиће од врсте ћелије. Добро измешати. Овај раствор је сада разблажен десет пута више од почетног узорка, тако да је његов фактор разблажења 10-1. Означи га. Поновите ово неколико пута, стерилном пипетом сваки пут, док раствор није довољно разблажен. Ако сте га разблажили други пут, друга епрувета је разређена 100 пута више од почетног раствора, тако да је фактор разблажења 10-2 и тако даље.

    Можда ћете требати испробати неколико разблажења да бисте одредили прави фактор разблаживања за бројање. Комора за бројање је у основи врло мала, бистра, правоугаона кутија са прецизном дубином и прецизном решетком утиснутом на врху. Такође је познат и као хемоцитометар, или понекад хемацитометар. Циљ је да суспензија буде довољно разблажена да се, када се гледа у комору за бројање, ниједна ћелија не преклапа и оне се дистрибуирају по мрежи једнолико. Пипетирану разблажену суспензију која садржи ћелије пипетирајте у отвор у бројачкој комори, где ће се она капиларно деловати у мрежну комору. Поставите комору за бројање на сцену микроскопа и погледајте је под ниском снагом.

    Решетка садржи квадрате који су направљени од још мањих квадрата. Изаберите отприлике четири или пет квадрата, или колико год вам је потребно да избројите најмање 100 ћелија, по обрасцу по вашем избору, као што су четири угла и средишњи квадрат. Ако су ћелије велике, то би могли бити велики квадрати, али ако су ћелије мале, умјесто тога можете одабрати мање квадрате.

    Специфична запремина сваког квадратног решетка може варирати у зависности од броја произвођача коморе, али често је дубина коморе 0,1 милиметара, површина великих квадрата 1 квадратни милиметар, а површина мањих квадрата 0,04 квадратна милиметра. Већи квадрати, дакле, имају запремину од 0,1 кубика милиметра. За овај пример, претпоставимо да сте избројали 103 ћелије у пет квадрата и да сте разблажили почетни узорак све док фактор разблажења није био 10-2.

    Ако сваки квадрат мреже има запремину од 0,1 кубних милиметара и броји се пет, тада је укупна запремина коморе која се броји износила 0,5 кубних милиметара, а било је 103 ћелије. Удубљено да би га направио 1 кубни милиметар направио би 206 ћелија. Један кубни центиметар еквивалентан је 1 милилитру, што је корисно за мерење течности. У кубном центиметру има 1.000 милиметара. Према томе, да је постојала суспензија кубичног центиметра или милилитара, бројали бисте 206.000 (206 к 1.000) ћелија. Ово изгледа као једначина:

    Количина мрежног квадрата × број квадрата = укупна запремина одбројане суспензије

    Број ћелија ÷ запремина пребројане суспензије = број ћелија по милиметрима кубичним

    Број ћелија по милиметрима кубичан × 1000 = број ћелија по милилитру

    Морате да водите рачуна о сваком разблажењу како би се почетни раствор учинио бројљивим под микроскопом. У овом примеру, фактор разблажења је 10-2. Да бисте израчунали почетну концентрацију раствора:

    Број ћелија по милилитру ÷ фактор разблажења = Концентрација ћелија

    За овај пример, број ћелија по милилитру је 206.000, а дељење је са 10-2 (0,01) даје концентрација ћелија од 20,600 000 ћелија по милилитру у почетном узорку.