Садржај
Научници користе серијска разблажења (серија разблажења од 1:10) како би израчунали густину насељености бактеријских култура. Када се култура која садржи мали број бактерија буде посађена и инкубирана, свака ћелија теоретски ће бити довољно далеко од осталих ћелија да ће формирати своју колонију. (У стварности, неке колоније могу бити потомци двеју ћелија у близини, али то је ретко у разблаженим културама, па је број колонија веома добра процена броја ћелија које су првобитно пребачене на плочу.) Зато што је густина насељености једнака непознато, разна разблажења морају се употребити да би се на једној плочи завршио одговарајући број колонија.
Серијска разблажења
Означите шест епрувета (свака садржи 9 мл медија за раст) као 1 до 6. Означите шест плоча агарима од 1 до 6. Помоћу пипета и стерилним врхом пипете од 1 милилитара (мл) пренесите 1 мл бактеријске културе у епрувету. 1.
Добро измешајте и пренесите 1 мл из епрувете 1 у епрувету 2 помоћу пипета и стерилних 1 мл савета.
Поновите корак 2 за преостале епрувете, сваки пут преносећи 1 мл из последње употребљене епрувете у следећу епрувету.
Помоћу пипета и стерилних 0,1 мл савета пренесите 0,1 мл из епрувете 1 на плочу са агарима. Запалите стаклену шипку у облику слова Л и употребите је да равномерно распоредите кап по тањиру. Инкубирајте плочу 48 сати на одговарајућој температури за бактерије које се користе. Различите врсте бактерија имају различите оптималне температуре раста. Ако не можете да пронађете оптималну температуру раста помоћу референтног материјала, покушајте да инкубирате плоче на 25 и 37 степени.
Поновите корак 4, сваки пут преносећи течност из друге епрувете на одговарајућу плочу.
Калкулације становништва
Посматрајте шест плоча и изаберите ону са 30 до 200 изолованих колонија.
Помножите број колонија на плочи са 10 да бисте израчунали број ћелија по мЛ културе из коришћене епрувете за разређивање.
Помножите број из корака 2 са 10 ^ (број плоче) да бисте израчунали број ћелија по мЛ оригиналне културе. Вредност 10 ^ (број плоче) је фактор разблаживања културе која се користи да се ова плоча неседује.