Садржај
Биохемија проучава молекуле попут ДНК, РНК и протеина. Технике мрља су оно што научници користе да би одвојили ове врсте молекула. У ћелијама они постоје као смеша. Ударање омогућава истраживачима да пронађу један протеин међу многим, попут игле у пласту сијена. Испирање се обично врши пуштањем смеше ДНК, РНК или протеина који тече кроз плочу гела. Овај гел омогућава малим молекулама да се крећу брже од већих. Одвојени молекули се затим притисну на мембрану, што помаже премештању молекула из гела на мембрану. Молекули се лепе за мембрану, али остају на истој локацији, одвојени један од другог, као да су још увек у гелу.
Вестерн Блот
Вестерн блотнинг је уобичајена техника за одвајање протеина по величини, али у правим колонама. Ове паралелне колоне омогућавају истраживачима да упореде количину протеина у различитим узорцима који се трче један поред другог, као што су куглачке стазе. На пример, ако би тестирали утицај различитих количина лека на раст ћелија, третирали бисте четири различите групе ћелија различитом количином лека. Тада можете разбити ћелије и отворити протеине сваке групе у посебним тракама на гелу. Распростирање протеина на овај начин омогућава вам да видите шта повећава концентрација лекова на одређени протеин.
Нортхерн Блот
Северно брисање се користи за откривање РНА. Ћелије се могу отворити да ослободе своју РНК. РНА из различитих типова ћелија може се изводити на посебним тракама гела. Гел шири различите РНК по величини. Ови уредни, паралелни редови РНА омогућавају истраживачу да упореди који тип ћелије има колико од које РНА. Ова метода омогућава истраживачу да утврди да ли ћелије одређене болести имају више ове РНА или мање те РНК. Северна флека може открити како болест делује на нивоу производње РНА.
Соутхерн Блот
Соутхерн блоттинг је оригинална техника брисања, која је покренула систем именовања. Смислио га је Едвин Соутхерн. Соутхерн блот се користи за откривање количине ДНК у смеши. Баш као што је случај са протеинима и РНА, ДНК ћелије може се ослободити када се та ћелија отвори. Соутхерн блотнинг одваја ДНК од различитих типова ћелија по величини. ДНК из сваког узорка се шири у уредне, паралелне траке. Појединачни делови ДНК могу се открити помоћу радиоактивне или флуоресцентне сонде која је дизајнирана тако да се веже само за тај део ДНК. Енергетски сигнал из радиоактивне сонде или бљескови светлости из флуоресцентног сигнала, говоре истраживачима колики је део тог ДНК у сваком узорку.
Друге мрље
Три главне технике брисања - западна, северна и јужна - модификоване су на различите начине да се открију нешто различити молекули. На пример западна мрља вс јужна мрља. открива протеин и ДНК, респективно. Свака модификована техника се углавном изводи на уобичајен начин, али користи се другачијом методом за откривање молекула који се шири у паралелне траке. Југозападне мрље откривају молекуле протеина заглављене у ДНК. Северозападне мрље откривају молекуле протеина залепљене у РНА. Фарвестерн блотс откривају молекуле протеина залеђене на друге протеине.