Садржај
- Боља визуализација
- Идентификација и класификација
- Откривање одрживости
- Идентификација ћелијских структура
Микробиолози проучавају карактеристике микроорганизама као што су алге, протозоје, бактерије, гљивице и вируси помоћу микроскопа. Иако је неке организме попут протозоја и ћелија квасца лако уочити помоћу влажног дрвета, бактеријским ћелијама је потребно обојење. Научници су развили неколико метода попут бојења по Граму, брзог бојења киселинама и флуоресцентног бојења за бољу визуализацију бактеријских ћелија и ћелијских структура. Користећи такве методе бојења, могуће је идентифицирати структурне карактеристике које помажу у класификацији бактерија.
Боља визуализација
Бактеријски организми су толико мали да их је већина видљива само под микроскопом са увећањем од 1000Кс. Међутим, само повећавање величине не даје довољан степен јасноће, тако да бактерије морају бити обојене пре посматрања како би се обезбедила јасноћа потребна за визуелизацију.
Идентификација и класификација
Бојење бактерија ради разликовања између врста бактерија познато је и као диференцијално бојење. Мрља по Граму је једна таква диференцијална мрља која разликује бактерије на основу садржаја ћелијске стијенке. У овој методи, бактеријске ћелије реагују са кристално љубичастом бојом и поприме љубичасту боју. Када додају средство за уклањање боје, неке бактеријске ћелије изгубе боју док друге не. Додајући сафранинску мрљу, деколоризоване ћелије узимају мрљу тако да постану црвене док бактеријске ћелије које нису изгубиле боју остају љубичасте. Бактеријске ћелије које поприме црвену боју називају се грам-негативни организми, а оне које не попримају боју класификују се као грам-позитивни организми. Бојење по граму пружа брзу методу за почетну идентификацију бактерија које су укључене у инфекције. Слично томе, поступак брзог бојења помоћу киселине помаже да се специфично идентификују организми из класе бактерија званих Мицобацтериа, као што је Мицобацтериум туберцулосис.
Откривање одрживости
У узорцима бактеријске културе често је важно открити присуство живих бактеријских ћелија. Методе бојења, попут флуоресцентног бојења, помажу да се утврди да ли су ћелије културе одрживе или не. Живе бактерије имају способност претварања 5-цијано-2,3-дитолил-тетразолијум-хлорида (ЦТЦ) у боју која показује црвену флуоресценцију. Стога, када културе обојене са ЦТЦ емитују такву флуоресценцију, то указује на присуство одрживих бактерија. Пропидијум јодид је мрља која делује само на неживе ћелије које поседују оштећене мембране и, стога, је корисна у идентификовању мртвих бактеријских ћелија.
Идентификација ћелијских структура
Бојење пружа методу јасне визуелизације неколико ћелијских структура. На пример, метода фарбања горивом омогућава идентификацију језгра у бактеријским ћелијама, док је Албертова мрља корисна у визуелизацији метахроматских гранула. Слично томе, техника импрегнације у сребру омогућава идентификацију спирохета. Флагеле је лако приметити када су обојене Риу-овом мрљом. Бијела боја од малахита помаже у препознавању бактеријских спора.