Садржај
Есцхерицхиа цоли, Е. цоли, је бактерија која расте у доњим цревима сисара. Ова бактерија је први пут откривена крајем 1800-их. Од тада, она има дугу историју употребе у научним истраживањима. То је најчешће коришћени организам у молекуларној генетици. Део разлога што се Е. цоли често користи у научним истраживањима је тај што је лако расти у лабораторији. Чимбеници који Е. Цоли олакшавају узгој су његове једноставне прехрамбене потребе, брза стопа раста и умерени захтеви у одржавању.
Стерилизирајте петљу за инокулирање тако што ћете је ставити у пламен Бунсен горионика. Провуците доњу половину петље кроз пламен док не поцрвени.
Оставите петљу да се охлади. Можете је додирнути стерилним агром на тањиру да бисте били сигурни да се охладила. Не стављајте петљу на сто и не дозволите да контактира било шта друго осим стерилног агара или жељене културе сада када је стерилисана.
Умочите петљу у културу Е. цоли и уклоните је.
Отворите плочу са агарима и лагано клизите петљу напред-назад по површини једног одсека агара. Пазите да се не прогрејете кроз агар са петљом. Агар обезбеђује хранљиве материје којима Е. Е. цоли треба да расте.
Ставите петљу у пламен Бунсен горионика да бисте је стерилизирали. Једном када се штап за хлађење охлади, додирните га стерилним делом тањира да бисте били сигурни да је хладан, а затим гурните петљу кроз своју прву траку да направите други трак. Ова друга линија је разблажена верзија прве пруге. Понављајте овај поступак стерилизације и клизања све док се више одсека плоче са агарима не поклопи. Разлог због којег то радите јесте да касније можете бирати из појединих, клонских колонија. Ово ће вам помоћи да имате барем један део који има појединачне колоније - не превише концентрисане (што ће имати превелики раст и не дозвољава вам да бирате из једне колоније) и не превише разблажено (што не би дало колоније) .
Стерилизујте петљу на пламену последњи пут пре него што је одложите у радну зону.
Вратите врх на плочу са агарима. Плочу окрените наопако и ставите је у инкубатор постављен на 37 степени Целзијуса (98,6 степени Фаренхеита). Ова идеална температура инкубирања симулира температуру људског тела у којој борави Е. цоли. За 24 до 48 сати на плочи са агарима ће се појавити видљиве колоније бактерија Е. цоли.