Као што је случај при коришћењу било којег научног инструмента, требате бити сигурни да је инструмент у исправном стању пре него што га употребите за анализу узорка. Провјеравањем одговора инструмента за познати узорак потврђује се да ли је инструмент правилно калибриран. Спектрофотометри захтевају периодичну калибрацију да би се обезбедио тачан одзив инструмента. Инфрацрвени (ИР) спектрофотометри користе полистирен као стандард за калибрацију. Скенирање инструмента са комадом полистирена у држачу за узорак провериће присуство пикова виђених на ИР спектрима и релативни интензитет врхова.
Укључите спектрофотометар и оставите га да се загрева најмање 10 минута. Време загревања је потребно да би се извор стабилизовао. Без стабилног извора не можете се ослонити на добијене спектре. Аналитички сигнал се ослања на пригушивање извора зрачења узорком.
Покрените стандард за калибрацију стављањем комада полистиренске фолије у држач узорка. Без пробног трчања помоћу узорка познатих спектра званих стандард, немате сигурност да спектрофотометар исправно ради.
Дохватите спектре за узорак полистирена. Упоредите спектре са оним у стандардној референци ИР спектра. Уверите се да сви очекивани врхови постоје на тестним спектрима. Локација врхова мора се ускладити са таласном дужином апсорпције.
Проверите спектре да бисте били сигурни да је јачина сигнала унутар 95 процената од максималне за најјачи врх. Ако је најјачи врх спектра више или мањи од пуне скале, подесите пригушење да бисте добили исправну јачину сигнала.
Често калибрирајте ИЦ спектрофотометар. Минимална учесталост калибрације треба да укључује скенирање непосредно пре и дан након вашег рада.